Furaltadone (AMOZ) ELISA Test Kit για την ανίχνευση μέλι γαρίδες / κρέας / Hepar

Φουραλταδόνη (AMOZ) ELISA Test Kit

Περιγραφή του προϊόντος

REAGEN^ΤΜΤο Furaltadone ((AMOZ) ELISA Test Kit παρέχει μια ανταγωνιστική ενζυμική ανοσολογική ανάλυση για την ποσοτική ανάλυση της furaltadone στα ψάρια, τις γαρίδες, το κρέας (κοτόπουλο, βόειο κρέας, χοιρινό κρέας και επαρ), τα αυγά, το μέλι.

• Γρήγορες (4 ώρες), υψηλή ανάκτηση (80-105%) και οικονομικά αποδοτικές μεθόδους εξαγωγής για διάφορα δείγματα.

• Υψηλή ευαισθησία (0,05 ng/g ή ppb) και χαμηλό όριο ανίχνευσης (0,1 ng/g ή ppb) για διάφορα δείγματα.

• Υψηλή αναπαραγωγικότητα.

• Ταχύς έλεγχος ELISA (λιγότερο από 1 ώρα ανεξάρτητα από τον αριθμό των δειγμάτων).

Σύνοψη της διαδικασίας

Η μέθοδος βασίζεται σε ανταγωνιστική χρωματιστομετρική δοκιμή ELISA.Το δείγμα και το αντισώμα AMOZ προστίθενται μαζί με το δευτερογενές αντισώμα.Αν το υπολείμμα του AMOZ είναι παρόν στο δείγμα, θα ανταγωνιστεί για το αντισώμα του AMOZ,εμποδίζοντας έτσι το αντισώμα να δεσμευτεί στο AMOZ-BSA που συνδέεται με το πηγάδιΗ προκύπτουσα ένταση χρώματος, μετά την προσθήκη του υποστρώματος HRP (TMB), έχει αντίστροφη σχέση με τη συγκέντρωση υπολειμμάτων AMOZ στο δείγμα.

Περιεχόμενο του κιτ, αποθήκευση και διάρκεια ζωής

REAGEN^ΤΜΗ συσκευή δοκιμής ELISA της φουραλταδόνης (AMOZ) έχει χωρητικότητα 96 προσδιορισμών ή δοκιμών 42 δειγμάτων σε διπλό αντίγραφο (υποθέτοντας 12 πηγάδια για τα πρότυπα).Επιστρέψτε τα μη χρησιμοποιημένα μικροκύτταρα στην τσάντα από χαλί και ξανασφράγισέ τα με το αποξηρατικό που παρέχεται στην αρχική συσκευασία. Αποθηκεύστε το κιτ σε θερμοκρασία 2- 8°C.* Η διάρκεια ζωής είναι 12 μήνες όταν το κιτ αποθηκεύεται σωστά.

* Εάν δεν σκοπεύετε να χρησιμοποιήσετε το κιτ για περισσότερο από 1 μήνα, αποθηκεύστε το αντισώμα # 1 και το HRP- συνδυασμένο αντισώμα # 2 σε θερμοκρασία - 20 °C ή σε κατάψυξη.

Ευαισθησία (όριο ανίχνευσης)

Ειδικότητα (σταυροδραστικότητα)

Απαιτούμενα υλικά που δεν παρέχονται με το κιτ

1.Μικροτύτρης αναγνώστης πινακίδων (450 nm)

2.Ενσωματωτής

3.Μικρατήρας ιστών (π.χ. Omni TissueMaster Homogenizer)

4Εξατμιστήρας περιστροφής ή αέριο αζώτου

5.Μικρατήρας δίνης (π.χ. μικρατήρας δίνης Gneie της VWR)

6.10, 20, 100 και 1000 ml πιπέτες

7Πολυκανάλινη πιπέτα: 50-300 ml (προαιρετική)

8.Ακετάτη αιθυλίου

9.0.1 M K2HPO4

10.n-εξάνιο (ή n-επτάνιο)

11.1M NaOH

12.1M HCL

Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις

• Τα πρότυπα περιέχουν φουραλταδόνη.

• Μην χρησιμοποιείτε το κιτ μετά την ημερομηνία λήξης.

• Δεν πρέπει να αναμειγνύονται αντιδραστήρες από διαφορετικά κιτ ή παρτίδες, εκτός από τα συστατικά με τον ίδιο αριθμό μέρους εντός των ημερομηνιών λήξης τους.

• Προσπαθήστε να διατηρήσετε μια εργαστηριακή θερμοκρασία των 20° 25° C (68° 77° F). Αποφύγετε την εκτέλεση δοκιμών κάτω ή κοντά σε εξαεριστικές πύλες, καθώς αυτό μπορεί να προκαλέσει υπερβολική ψύξη, θέρμανση και/ή εξατμίωση.να μην εκτελούνται δοκιμές σε άμεσο ηλιακό φως, καθώς αυτό μπορεί να προκαλέσει υπερβολική θερμότητα και εξατμίωση.Οι ψυχρές κορυφές των τραπεζών θα πρέπει να αποφεύγονται τοποθετώντας πολλά στρώματα χαρτοπετσέτας ή κάποιο άλλο μονωτικό υλικό κάτω από τις πλάκες δοκιμής κατά τη διάρκεια της επώασης..

• Βεβαιωθείτε ότι χρησιμοποιείτε μόνο αποσταγμένο ή αποιονισμένο νερό, δεδομένου ότι η ποιότητα του νερού είναι πολύ σημαντική.

• Κατά την πίπετση δειγμάτων ή αντιδραστηρίων σε άδεια πλάκα μικροτίτρου, τοποθετήστε τις άκρες της πίπεττας στην κάτω γωνία του πηγάδι, σε επαφή με το πλαστικό.

• Οι ενδυμασίες των πινακίδων δοκιμών πρέπει να είναι χρονικές όσο το δυνατόν πιο ακριβώς.

• Προσθέστε πρότυπα στην πλάκα μόνο με τη σειρά από χαμηλή συγκέντρωση σε υψηλή συγκέντρωση, καθώς αυτό θα ελαχιστοποιήσει τον κίνδυνο συμβιβασμού της πρότυπης καμπύλης.

• Πάντα να κρύβετε τις πλάκες σε σφραγισμένες σακούλες με αποξηρατικό για να διατηρήσετε τη σταθερότητα.Αποτρέψτε τη δημιουργία συμπύκνωσης στις πλάκες επιτρέποντάς τους να ισορροπήσουν σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 ° C / 68 77 ° F) ενώ βρίσκονται στην συσκευασία.

Προετοιμασία δείγματος

Βεβαιωθείτε ότι τα δείγματα αποθηκεύονται σωστά. Γενικά, τα δείγματα θα πρέπει να διατηρούνται σε ψυγείο σε θερμοκρασία 2-4°C για όχι περισσότερο από 1-2 ημέρες.Τα κατεψυγμένα δείγματα μπορούν να αποψυγούνται σε θερμοκρασία δωματίου (20°C / 68°F) ή σε ψυγείο πριν από τη χρήση..

Ψάρια

• Αναμειγνύεται 1 g ομογενοποιημένου δείγματος με 0,5 ml 1X Sample Extraction Buffer, 3,5 ml αποσταγμένου νερού, 0,5 ml 1 M HCl και 20 ml 50 mM 2-Nitrobenzaldehyde με στρογγυλοποίηση για 30 δευτερόλεπτα.

• Εμφύσηση σε θερμοκρασία 50°C -55°C για 3 ώρες.

• Προσθέστε 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 M NaOH και 6 ml αιθυλοακεταμένου, δίνη για 2 λεπτά.

• Κεντρίφωση σε θερμοκρασία 4.000 x g για 5 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 °C).

• Μεταφέρετε 3 ml του υπερεπιβαλλόμενου οξέος αιθυλίου (που αντιστοιχεί σε 0,5 g του αρχικού δείγματος) σε ένα νέο φιαλίδιο (F Αποφύγετε το κάτω υδατικό στρώμα!εκκεντρώνουμε την εκχυλισμένη αιθυλοασθεία για 5 λεπτά σε θερμοκρασία 4Σε περίπτωση που συμβεί η γαλακτοποίηση και το άνω στρώμα αιθυλοασθαλίνης είναι μικρότερο από 3 ml, το δείγμα επώασης σε μπάνιο νερού για 3 λεπτά σε θερμοκρασία 85 °C.Χρησιμοποιήστε περιστροφικό εξατμιστήρα για να στεγνώσετε το δείγμα σε μπάνιο νερού 60-70 °C υπό μειωμένη πίεσηΕναλλακτικά, το δείγμα μπορεί να στεγνώσει με φούσκωση αέρια αζώτου σε ένα μπάνιο νερού 60-70 °C.

• Το αποξηραμένο κατάλοιπο διαλύεται σε 1 ml n-εξανού (ή n-επτάνου).

• Προσθέστε 1 ml1XΔοκιμαστικό απομάκρυνσης δείγματος, στροβιλίστε το δείγμα για 2 λεπτά.

• Το δείγμα φυγοκεντρώνεται σε θερμοκρασία 4.000 x g για 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 °C / 68 77 °F).

• Για την ανάλυση χρησιμοποιούνται 50 ml του κατώτερου υδατικού στρώματος ανά πηγάδι.

Σημείωση:Για να αποφευχθεί υψηλό φόντο, συνιστάται να παρασκευάζεται παράλληλα ένα κενό δείγμα διαλύτη.αρχίζοντας με τη μείωση των 3 ml αιθυλοακετατικού σε ξηρότητα και συνεχίζοντας με τη διαδικασία εκχύλισης κατά την υπόλοιπη περίοδοΤο αποτέλεσμα του ελέγχου με διαλύτη αφαιρείται από τα αποτελέσματα του δείγματος.

Καραμέλες/Κρέας/Hepar

• Αναμειγνύεται 1 g ομογενοποιημένου δείγματος με 0,5 ml 1X Sample Extraction Buffer, 3,5 ml αποσταγμένου νερού, 0,5 ml 1 M HCl και 20 ml 50 mM 2-Nitrobenzaldehyde με δίνη για 30 δευτερόλεπτα.

• Επικυρώνεται σε θερμοκρασία 50°C -55°C για 3 ώρες.

• Προσθέστε 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 mL 1 M NaOH και 6 mL αιθυλοακετάτη, περιστροφή για 5 λεπτά.

• Κεντρίφωση σε 4.000 x g για 5 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 °C / 68 77 °F).

• Μεταφέρετε 3, 0 ml του υπερεπιβαλλόμενου οξέος αιθυλίου (που αντιστοιχεί σε 0, 5 g του αρχικού δείγματος αυγού) σε ένα νέο φιαλίδιο (F Αποφύγετε το κάτω υδατικό στρώμα!εκκεντρώνουμε την εκχυλισμένη αιθυλοασθεία για 5 λεπτά σε θερμοκρασία 4Χρησιμοποιήστε έναν περιστρεφόμενο εξατμιστήρα για να στεγνώσετε το δείγμα σε ένα μπάνιο νερού 60-70 °C υπό μειωμένη πίεση.το δείγμα μπορεί να στεγνώσει με φούσκωση αζώτου σε νερολουμάνι 60-70 °C.

• Το αποξηραμένο κατάλοιπο διαλύεται σε 1 ml n-εξανού (ή n-επτάνου).

• Προσθέστε 1 ml1XΑπορρόφηση δείγματος και στρογγυλοποίηση του δείγματος για 2 λεπτά.

• Το δείγμα φυγοκεντρώνεται σε θερμοκρασία 4.000 x g για 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 °C / 68 77 °F).

• Για την ανάλυση χρησιμοποιούνται 50 ml του κατώτερου υδατικού στρώματος ανά πηγάδι.

ΣημείωσηΓια να αποφευχθεί το υψηλό φόντο, συνιστάται να παρασκευάζεται παράλληλα ένα κενό δείγμα διαλύτη.αρχίζοντας με τη μείωση 3 ml αιθυλοακετάτη σε ξηρότητα και συνεχίζοντας με τη διαδικασία ανάπαυσηςΤο αποτέλεσμα του ελέγχου με διαλύτη αφαιρείται από τα αποτελέσματα του δείγματος.

Αβγό

• Αναμειγνύεται 1 g δείγματος αυγού με 0,5 ml 1X Sample Extraction Buffer, 3,5 ml αποσταγμένου νερού, 0,5 ml 1 M HCl και 20 ml 50 mM 2-Nitrobenzaldehyde με στρογγυλοποίηση για 2 λεπτά.

• Εμφύσηση σε θερμοκρασία 50°C -55°C για 3 ώρες.

• Προστίθενται 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 M NaOH και 6 ml αιθυλοακετάτου, δίνη 5 λεπτά με μέγιστη ταχύτητα.

• Κεντρίφωση σε 4.000 x g για 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 °C / 68 77 °F).

• Μεταφέρετε 3, 0 ml του υπερεπιβαλλόμενου οξέος αιθυλίου (που αντιστοιχεί σε 0,5 g του αρχικού δείγματος μελιού) σε ένα νέο φιαλίδιο (F Αποφύγετε το κάτω υδατικό στρώμα!εκκεντρώνουμε την εκχυλισμένη αιθυλοασθεία για 5 λεπτά σε θερμοκρασία 4Χρησιμοποιήστε έναν περιστρεφόμενο εξατμιστήρα για να στεγνώσετε το δείγμα σε ένα μπάνιο νερού 60-70 °C υπό μειωμένη πίεση.το δείγμα μπορεί να στεγνώσει με φούσκωση αζώτου σε νερολουμάνι 60-70 °C.

• Το αποξηραμένο κατάλοιπο διαλύεται σε 1 ml n-εξανού (ή n-επτάνου).

• Προσθέστε 1 ml1XΔοκιμαστικό απορρόφησης και δίνη για 2 λεπτά.

• Το δείγμα φυγοκεντρώνεται σε θερμοκρασία 4.000 x g για 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 °C / 68 77 °F).

• Για την ανάλυση χρησιμοποιούνται 50 ml του κατώτερου υδατικού στρώματος.

Σημείωση: Συντελεστής αραίωσης: 2. (1) Μετά την εξατμίωση του εκχυλίσματος αιθυλοακετατίου, το υπολειμματικό που προκύπτει δεν διαλύεται πλήρως.(2) Για το παρασκεύασμα αυτό, συνιστούμε να χρησιμοποιηθεί η τυποποιημένη τιμή 0,5 ng/g ή ppb ως τιμή διαχωρισμού για τα θετικά δείγματα, δεδομένου ότι τα αρνητικά δείγματα θα μπορούσαν να παρουσιάσουν σημαντικές επιδράσεις υπόβαθρου (σε ορισμένες περιπτώσεις μεταξύ των προτύπων 0.05 ng/g και 00,15 ng/g).