Εξάρτηση δοκιμής της ELISA Furaltadone (AMOZ) για τις γαρίδες/το κρέας/Hepar μελιού ανίχνευσης

Εξάρτηση δοκιμής της ELISA Furaltadone (AMOZ)

Περιγραφή προϊόντων

Η εξάρτηση δοκιμής της ELISA ^{™Furaltadone} REAGEN (AMOZ) παρέχει ανταγωνιστικό ενζυμικό immunoassay για την ποσοτική ανάλυση του furaltadone στα ψάρια, γαρίδες, κρέας (κοτόπουλο, βόειο κρέας, χοιρινό κρέας και hepar), αυγά, ακόνι.

• Γρήγορη (4 ώρες), υψηλή αποκατάσταση (80 - 105%), και οικονομικώς αποδοτικές μέθοδοι εξαγωγής για τα διάφορα δείγματα.

• Υψηλή ευαισθησία (0,05 ng/g ή ppb) και χαμηλό όριο ανίχνευσης (0,1 ng/g ή ppb) για τα διάφορα δείγματα.

• Υψηλή δυνατότητα αναπαραγωγής.

• Μια γρήγορη δοκιμή της ELISA (ώρες λιγότερο από 1 ανεξάρτητα από τον αριθμό δειγμάτων).

Επισκόπηση διαδικασίας

Η μέθοδος είναι βασισμένη σε μια ανταγωνιστική χρωματομετρική δοκιμή της ELISA. Το amoz-BSA έχει ντυθεί στα φρεάτια πιάτων. Κατά τη διάρκεια της ανάλυσης, το δείγμα και το αντίσωμα AMOZ προστίθενται το δευτεροβάθμιο αντίσωμα, που κολλιέται μαζί με με ένα peroxidase ένζυμο. Εάν το υπόλειμμα AMOZ είναι παρόν στο δείγμα, θα ανταγωνιστεί για το αντίσωμα AMOZ, με αυτόν τον τρόπο αποτρέποντας το αντίσωμα από τη δέσμευση στο amoz-BSA που συνδέεται με το φρεάτιο. Η προκύπτουσα ένταση χρώματος, μετά από την προσθήκη του υποστρώματος HRP (TMB), έχει μια αντίστροφη σχέση με τη συγκέντρωση υπολειμμάτων AMOZ στο δείγμα.

Περιεχόμενο, αποθήκευση και ζωή του προϊόντος στο ράφι εξαρτήσεων

Η εξάρτηση δοκιμής της ELISA ^{™Furaltadone} REAGEN (AMOZ) έχει την ικανότητα για 96 προσδιορισμούς ή τη δοκιμή 42 δειγμάτων εις διπλούν (υποθέτοντας 12 φρεάτια για τα πρότυπα). Επιστρέψτε οποιαδήποτε αχρησιμοποίητα microwells στην τσάντα φύλλων αλουμινίου και τα ξανασφραγίστε με desiccant που παρέχεται στην αρχική συσκευασία. Αποθηκεύστε την εξάρτηση σε 2-8°C*. Η ζωή του προϊόντος στο ράφι είναι 12 μήνες όταν αποθηκεύεται κατάλληλα η εξάρτηση.

* Εάν δεν προγραμματίζετε να χρησιμοποιήσετε την εξάρτηση για πάνω από 1 μήνα, αποθηκεύστε Antibody#1 και το HRP-κλιμένο αντίσωμα #2 σε -20°C ή σε έναν ψυκτήρα.

Ευαισθησία (όριο ανίχνευσης)

Ιδιομορφία (Cross-Reactivity)

Απαραίτητα υλικά που δεν παρέχονται την εξάρτηση

1.Microtiter αναγνώστης πιάτων (450 NM)

2.Incubator

3.Tissue αναμίκτης (π.χ. Homogenizer Omni TissueMaster)

4.Rotary αέριο εξατμιστήρων ή αζώτου

5.Vortex αναμίκτης (π.χ. αναμίκτης δίνης Gneie από VWR)

6.10, 20, 100 και 1000 σιφώνια μιλ.

7.Multi-κανάλι σιφώνιο: 50-300 μιλ. (προαιρετικά)

8.Ethyl οξικό άλας

9.0.1 Μ K2HPO4

10.n-εξάνιο (ή ν-επτάνιο)

NaOH 11.1M

HCL 12.1M

Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις

• Τα πρότυπα περιέχουν Furaltadone. Λαβή με την ιδιαίτερη προσοχή.

• Μην χρησιμοποιήστε την εξάρτηση μετά από την ημερομηνία λήξης.

• Μην ανακατεψτε τα αντιδραστήρια από τις διαφορετικές εξαρτήσεις ή τα μέρη εκτός από τα συστατικά με του ίδιου αριθμού μερών μέσα στις ημερομηνίες λήξης τους. ΤΑ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΑ ΚΑΙ ΤΑ ΠΙΑΤΑ ΕΙΝΑΙ ΕΞΑΡΤΗΣΗ ΚΑΙ ΜΈΡΟΣ-ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΑ.

• Προσπαθήστε να διατηρήσετε μια εργαστηριακή θερμοκρασία 20°-25°C (68°-77°F). Αποφύγετε τις δοκιμές κάτω από ή κοντά στους εξαεριστήρες, δεδομένου ότι αυτό μπορεί να προκαλέσει την υπερβολική ψύξη, τη θέρμανση ή/και την εξάτμιση. Επίσης, μην τρέξτε τις δοκιμές στο άμεσο φως του ήλιου, δεδομένου ότι αυτό μπορεί να προκαλέσει την υπερβολικές θερμότητα και την εξάτμιση. Οι κρύες κορυφές πάγκων πρέπει να αποφευχθούν με την τοποθέτηση διάφορης πετσέτας στρωμάτων του εγγράφου ή κάποιου άλλου υλικού μόνωσης κάτω από τα πιάτα δοκιμής κατά τη διάρκεια της επώασης.

• Σιγουρευτείτε ότι χρησιμοποιείτε μόνο το αποσταγμένο ή εξιοντισμένο νερό δεδομένου ότι η ποιότητα νερού είναι πολύ σημαντική.

• Κατά την εισαγωγή στο σιφώνιο των δειγμάτων ή των αντιδραστηρίων σε ένα κενό microtiter πιάτο, τοποθετήστε τις άκρες σιφωνίων στη χαμηλότερη γωνία καλά, κάνοντας την επαφή με το πλαστικό.

• Οι επωάσεις των πιάτων δοκιμής πρέπει να είναι χρονομετρημένες όσο το δυνατόν ακριβέστερα. Να είστε συνεπής κατά την προσθήκη των προτύπων στο πιάτο δοκιμής. Προσθέστε τα πρότυπά σας πρώτα και έπειτα τα δείγματά σας.

• Προσθέστε τα πρότυπα στο πιάτο μόνο στη διαταγή από τη χαμηλή συγκέντρωση στην υψηλή συγκέντρωση δεδομένου ότι αυτό θα ελαχιστοποιήσει τον κίνδυνο την τυποποιημένη καμπύλη.

• Πάντα καταψύξτε τα πιάτα στις σφραγισμένες τσάντες με desiccant για να διατηρήσετε τη σταθερότητα. Αποτρέψτε τη συμπύκνωση από τη διαμόρφωση στα πιάτα με την άδεια τους εξισορροπεί στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F) ενώ στη συσκευασία.

ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ

Να είστε βέβαιος ότι τα δείγματα αποθηκεύονται κατάλληλα. Γενικά, τα δείγματα πρέπει να καταψυχτούν στο forno 2-4°C περισσότερο από 1-2 ημέρες. Δείγματα παγώματος σε ένα ελάχιστο -20°C εάν πρέπει να αποθηκευτούν για μια πιό μεγάλη περίοδο. Τα παγωμένα δείγματα μπορούν να ξεπαγωθούν στην αίθουσα temps (20 – 25°C/68 – 77°F) ή σε ένα ψυγείο πριν τη χρήση.

Ψάρια

• Μίγμα 1 γ του ομογενοποιημένου δείγματος με 0,5 μιλ. του απομονωτή εξαγωγής δειγμάτων 1X, 3,5 μιλ. του αποσταγμένου νερού, 0,5 μιλ. 1 HCL Μ και 20 μιλ. 50 χιλ. 2-Nitrobenzaldehyde με για 30 δευτερόλεπτα.

• Επωάστε σε 50°C -55°C για 3 ώρες. Δίνη το δείγμα για 5 δευτερόλεπτα κάθε ώρα κατά τη διάρκεια της επώασης.

• Προσθέστε 5 μιλ. 0,1 Μ K2HPO4, 0,4 μιλ. 1 NaOH Μ και 6 μιλ. του αιθυλικού οξικού άλατος, δίνη για 2 λεπτά.

• Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε 4.000 Χ γ για 5 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C).

• Μεταφέρετε 3 μιλ. του υπερκείμενου νερού αιθυλικού οξικού άλατος (που αντιστοιχεί σε 0,5 γ του αρχικού δείγματος) σε ένα νέο φιαλίδιο (το Φ αποφεύγει το χαμηλότερο υδάτινο στρώμα! Εάν μολύνεται με το χαμηλότερο στρώμα, υποβάλτε το αποσπασματικό αιθυλικό οξικό άλας σε φυγοκέντρωση για 5 λεπτά σε 4.000 Χ γ πάλι και πάρτε το ανώτερο οργανικό στρώμα). Σε περίπτωση που το γαλάκτωμα συνέβη και το ανώτερο στρώμα αιθυλικού οξικού άλατος ήταν λιγότερο από 3 μιλ., επωάστε το δείγμα στο νερό - λουτρό για 3 λεπτά σε 85°C.Use ένας περιστροφικός εξατμιστήρας για να ξεράνει το δείγμα σε ένα νερό 60-70°C - λουτρό υπό μειωμένη πίεση. Εναλλακτικά, το δείγμα μπορεί να είναι ξηρό με το φύσηγμα του αερίου αζώτου σε ένα νερό 60-70°C - λουτρό.

• Διαλύστε το ξηρό υπόλειμμα σε 1 μιλ. του νιτροεξάνιου (ή του ν-επτανίου).

• Προσθέστε 1 μιλ. 1 απομονωτή εξαγωγής δειγμάτωνΧ, δίνη το δείγμα για 2 λεπτά.

• Υποβάλτε το δείγμα σε φυγοκέντρωση σε 4.000 Χ γ για 10 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Χρήση 50mL του χαμηλότερου υδάτινου στρώματος ανά καλά για τη δοκιμή.

Σημείωση: Παράγοντας διαλύσεων: 2. Για να αποφευχθεί το υψηλό υπόβαθρο, συνιστάται ένα διαλυτικό κενό δείγμα να προετοιμάζεται παράλληλα, αρχίζοντας από τη μείωση 3 μιλ. του αιθυλικού οξικού άλατος ώσπου να ξεραθεί και συνεχίζεται με τη διαδικασία εξαγωγής υπολοίπου. Αφαιρέστε το αποτέλεσμα του διαλυτικού ελέγχου από τα αποτελέσματα δειγμάτων.

Γαρίδες το /Meat/Hepar

• Μίγμα 1 γ του ομογενοποιημένου δείγματος με τον απομονωτή εξαγωγής δειγμάτων 0,5 μιλ. 1X, 3,5 μιλ. του αποσταγμένου νερού, 0,5 μιλ. 1 HCL Μ και 20 μιλ. 50 χιλ. 2-Nitrobenzaldehyde με για 30 δευτερόλεπτα.

• Επωάστε at50°C -55°C για 3 ώρες. Δίνη το δείγμα για 5 δευτερόλεπτα κάθε ώρα κατά τη διάρκεια της επώασης.

• Προσθέστε 5 μιλ. 0,1 Μ K2HPO4, 0,4 μιλ. 1 NaOH Μ και 6 μιλ. του αιθυλικού οξικού άλατος, δίνη για 5 λεπτά.

• Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε 4.000 Χ γ για 5 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Μεταφέρετε 3,0 μιλ. του υπερκείμενου νερού αιθυλικού οξικού άλατος (που αντιστοιχεί σε 0,5 γ του αρχικού δείγματος αυγών) σε ένα νέο φιαλίδιο (το Φ αποφεύγει το χαμηλότερο υδάτινο στρώμα! Εάν μολύνεται με το χαμηλότερο στρώμα, υποβάλτε το αποσπασματικό αιθυλικό οξικό άλας σε φυγοκέντρωση για 5 λεπτά σε 4.000 Χ γ πάλι και πάρτε το ανώτερο οργανικό στρώμα). Χρησιμοποιήστε έναν περιστροφικό εξατμιστήρα για να ξεράνετε το δείγμα σε ένα νερό 60-70°C - λουτρό υπό μειωμένη πίεση. Εναλλακτικά, το δείγμα μπορεί να είναι ξηρό με το φύσηγμα του αερίου αζώτου σε ένα νερό 60-70°C - λουτρό.

• Διαλύστε το ξηρό υπόλειμμα σε 1 μιλ. του νιτροεξάνιου (ή του ν-επτανίου).

• Προσθέστε 1 μιλ. του απομονωτή και της δίνης εξαγωγής δειγμάτων 1X το δείγμα για 2 λεπτά.

• Υποβάλτε το δείγμα σε φυγοκέντρωση σε 4.000 Χ γ για 10 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Χρήση 50 μιλ. του χαμηλότερου υδάτινου στρώματος ανά καλά για τη δοκιμή.

Σημείωση: Παράγοντας διαλύσεων: 2. Για να αποφευχθεί το υψηλό υπόβαθρο, συνιστάται ένα διαλυτικό κενό δείγμα να προετοιμάζεται παράλληλα, αρχίζοντας από τη μείωση 3 μιλ. του αιθυλικού οξικού άλατος ώσπου να ξεραθεί και συνεχίζεται με τη διαδικασία υπολοίπου. Αφαιρέστε το αποτέλεσμα του διαλυτικού ελέγχου από τα αποτελέσματα δειγμάτων.

Αυγό

• Μίγμα 1 γ του δείγματος αυγών με 0,5 μιλ. του απομονωτή εξαγωγής δειγμάτων 1X, 3,5 μιλ. του αποσταγμένου νερού, 0,5 μιλ. 1 HCL Μ και 20 μιλ. 50 χιλ. 2-Nitrobenzaldehyde με για 2 λεπτά.

• Επωάστε σε 50°C -55°C για 3 ώρες. Δίνη το δείγμα για 5 δευτερόλεπτα κάθε ώρα κατά τη διάρκεια της επώασης.

• Προσθέστε 5mL 0,1 Μ K2HPO4, 0,4 μιλ. 1 NaOH Μ και 6 μιλ. του αιθυλικού οξικού άλατος, δίνη 5 λεπτά με την ανώτατη ταχύτητα.

• Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε 4.000 Χ γ για 10 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Μεταφέρετε 3,0 μιλ. του υπερκείμενου νερού αιθυλικού οξικού άλατος (που αντιστοιχεί σε 0,5 γ του αρχικού δείγματος μελιού) σε ένα νέο φιαλίδιο (το Φ αποφεύγει το χαμηλότερο υδάτινο στρώμα! Εάν μολύνεται με το χαμηλότερο στρώμα, υποβάλτε το αποσπασματικό αιθυλικό οξικό άλας σε φυγοκέντρωση για 5 λεπτά σε 4.000 Χ γ πάλι και πάρτε το ανώτερο οργανικό στρώμα). Χρησιμοποιήστε έναν περιστροφικό εξατμιστήρα για να ξεράνετε το δείγμα σε ένα νερό 60-70°C - λουτρό υπό μειωμένη πίεση. Εναλλακτικά, το δείγμα μπορεί να είναι ξηρό με το φύσηγμα του αερίου αζώτου σε ένα νερό 60-70°C - λουτρό.

• Διαλύστε το ξηρό υπόλειμμα σε 1 μιλ. του νιτροεξάνιου (ή του ν-επτανίου).

• Προσθέστε 1 μιλ. 1 απομονωτή και δίνης εξαγωγής δειγμάτωνΧ για 2 λεπτά.

• Υποβάλτε το δείγμα σε φυγοκέντρωση σε 4.000 Χ γ για 10 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Use50 μιλ. του χαμηλότερου υδάτινου στρώματος για τη δοκιμή.

Σημείωση: Παράγοντας διαλύσεων: 2. (1) μετά από την εξάτμιση του εκχυλίσματος αιθυλικού οξικού άλατος, το προκύπτον υπόλειμμα δεν διαλύεται εντελώς. Εντούτοις, το ποσοστό αποκατάστασης δεν θα συμβιβαστεί (>80%). (2) για αυτήν την προετοιμασία, συστήνουμε τα πρότυπα 0,5 ng/g ή ppb ως κομμένη αξία για τα θετικά δείγματα δεδομένου ότι τα αρνητικά δείγματα μπόρεσαν να παρουσιάσουν ιδιαίτερα αποτελέσματα υποβάθρου (σε ορισμένες περιπτώσεις μεταξύ των προτύπων 0,05 ng/g και 0,15 ng/g).