Streptomycin ™ REAGEN η εξάρτηση δοκιμής της ELISA είναι ανταγωνιστικό ενζυμικό immunoassay για την ποσοτική ανάλυση streptomycin και dihydrostreptomycin στην τροφή, το μέλι, το νεφρό, το συκώτι, το κρέας (βόειο κρέας, κοτόπουλο και χοιρινό κρέας), το γάλα, τον ορό και τα ούρα.
Τύπος δειγμάτων |
Όριο ανίχνευσης (ng/g ή ppb) |
Τροφή |
5 |
Μέλι |
2 |
Κρέας/συκώτι/νεφρό |
5 |
Γάλα |
1 |
Γάλα σε σκόνη |
1 |
Ορός/ούρα |
0,5 |
Κατάλοιπα |
Cross-reactivity (%) |
Streptomycin |
100 |
Γρήγορες (10 - 30 λεπτά), και οργανικές αντιδραστήριο-ελεύθερες μέθοδοι εξαγωγής για τα διάφορα δείγματα με την υψηλή αποκατάσταση (75 - 115%).
Υψηλή ευαισθησία (0,05 ng/g ή ppb) και χαμηλό όριο ανίχνευσης (1 ng/g ή ppb για το κρέας και το γάλα).
Υψηλή δυνατότητα αναπαραγωγής.
Μια γρήγορη δοκιμή της ELISA (λιγότερο από 2 ώρες ανεξάρτητα από τον αριθμό δειγμάτων).
Η μέθοδος είναι βασισμένη σε μια ανταγωνιστική χρωματομετρική δοκιμή της ELISA. Το streptomycin αντίσωμα έχει ντυθεί στα φρεάτια πιάτων. Κατά τη διάρκεια της ανάλυσης, το δείγμα προστίθεται μαζί με τη peroxidase streptomycin-χρένου κλίση. Εάν το streptomycin υπόλειμμα είναι παρόν στο δείγμα, θα ανταγωνιστεί για το streptomycin αντίσωμα, με αυτόν τον τρόπο αποτρέποντας το streptomycin-HRP από τη δέσμευση στο αντίσωμα που συνδέεται με το φρεάτιο. Η προκύπτουσα ένταση χρώματος, μετά από την προσθήκη του υποστρώματος HRP (TMB), έχει μια αντίστροφη σχέση με τη streptomycin συγκέντρωση υπολειμμάτων στο δείγμα.
Ονομάστε τις μεμονωμένες λουρίδες που θα χρησιμοποιηθούν και αντιδραστήρια υποπολλαπλάσιου για ακόλουθο παράδειγμα:
Συστατικό |
Όγκος ανά αντίδραση |
24 αντιδράσεις |
Streptomycin αντίσωμα #1 |
50 μιλ. |
1,2 μιλ. |
HRP-κλιμένο αντίσωμα #2 |
50 μιλ. |
1,2 μιλ. |
1X λύση πλυσίματος |
2,0 μιλ. |
48 μιλ. |
Απομονωτής στάσεων |
100 μιλ. |
2,4 μιλ. |
Υπόστρωμα TMB |
100 μιλ. |
2,4 μιλ. |
Προσθέστε 50uL κάθε Streptomycin των προτύπων εις διπλούν στα διαφορετικά φρεάτια (το Φ προσθέτει τα πρότυπα στο πιάτο μόνο στη διαταγή από τη χαμηλή συγκέντρωση στην υψηλή συγκέντρωση).
Προσθέστε το uL 50 κάθε δείγματος εις διπλούν στα διαφορετικά φρεάτια δειγμάτων.
Προσθέστε το uL 50 του HRP-κλιμένου αντισώματος #2 και του αντισώματος #1 50mL σε κάθε ένα καλά, μίγμα καλά με ήπια να λικνίσει το πιάτο με το χέρι για 1 λεπτό.
Επωάστε το πιάτο για 30 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F) ( Φ αποφεύγει το άμεσο φως του ήλιου και τις κρύες κορυφές πάγκων κατά τη διάρκεια της επώασης. Κάλυψη του microtiter πιάτου ενώ η επώαση συστήνεται).
Πλύντε το πιάτο 5 φορές με το uL 250 της λύσης πλυσίματος 1X. Μετά από το τελευταίο πλύσιμο, αναστρέψτε το πιάτο και τρυπήστε ήπια το πιάτο ξηρό στις πετσέτες εγγράφου (το Φ εκτελεί το επόμενο βήμα αμέσως μετά από τα βρώμικα ύδατα πιάτων. Μην επιτρέψτε στο πιάτο για να στεγνώσετε μεταξύ των λειτουργώντας βημάτων).
Προσθέστε το uL 100 του υποστρώματος TMB. Χρόνος η αντίδραση αμέσως μετά από να προσθέσει το υπόστρωμα. Αναμίξτε τη λύση με ήπια να λικνίσει το πιάτο με το χέρι για 1 λεπτό επωάζοντας ( Φ δεν έβαλε οποιοδήποτε υπόστρωμα πίσω στο αρχικό εμπορευματοκιβώτιο για να αποφύγει οποιαδήποτε πιθανή μόλυνση. Οποιαδήποτε λύση υποστρωμάτων που εκθέτει το χρωματισμό είναι ενδεικτική της επιδείνωσης και πρέπει να απορριφθεί. Κάλυψη του microtiter πιάτου ενώ η επώαση συστήνεται).
Μετά από να επωάσει για 15 λεπτά στη θερμοκρασία δωματίου (20 – 25°C/68 – 77°F), προσθέστε το uL 100 του απομονωτή στάσεων για να σταματήσετε την ενζυμική αντίδραση.
Διαβάστε το πιάτο το συντομότερο δυνατό μετά από την προσθήκη του απομονωτή στάσεων σε έναν αναγνώστη πιάτων με το μήκος κύματος 450 NM (το Φ πρίν διαβάζει, χρησιμοποιεί lint-free σκουπίζει στο κατώτατο σημείο του πιάτου για να μην εξασφαλίσει καμία υγρασία ή τα δακτυλικά αποτυπώματα παρεμποδίζουν τις αναγνώσεις).
Μας ελάτε σε επαφή με ανά πάσα στιγμή